Разтваряне на лиофилизирани пептиди: лабораторно ръководство

Изследователските пептиди се доставят лиофилизирани — изсушени чрез замразяване до бял прах или тънък слой на дъното на флакона. Водата е това, което позволява на пептидите да се разграждат, затова нейното отстраняване прави съединението достатъчно стабилно за транспорт и съхранение. Разтварянето е стъпката, в която тази вода се връща обратно, и именно там се случват повечето загуби, които могат да бъдат избегнати.

Бактериостатична срещу стерилна вода

Стерилната вода не съдържа консервант. След като флаконът бъде отворен, всичко попаднало в него може да се размножава. Бактериостатичната вода е същата вода с добавени 0,9% бензилов алкохол, който потиска растежа на бактерии, без да унищожава вече наличните. Практическата разлика е в срока на годност след отваряне: от флакон, разтворен с бактериостатична вода, могат да се вземат проби многократно в рамките на документирания срок при хладилно съхранение, докато стерилната вода е подходяща за еднократна работа.

Малък брой пептиди са несъвместими с бензилов алкохол и документацията им изисква обикновена стерилна вода. Проверявайте съединението, вместо да приемате.

Процедурата

• Оставете флакона да достигне стайна температура, преди да го отворите. Студеното стъкло привлича конденз, а тази вода не е стерилна.
• Почистете и двете запушалки — на пептида и на разтворителя — със спиртен тампон и ги оставете да изсъхнат.
• Изтеглете изчисления обем бактериостатична вода.
• Насочете иглата така, че струята да се стича по вътрешната стена на флакона. Никога не я изстрелвайте директно върху праха.
• Оставете съдържанието да се разтвори само. Ако е необходимо, завъртете флакона внимателно между пръстите си.
• Огледайте срещу светлината. Правилно разтвореният разтвор е бистър. Мътност, плаващи нишки или неразтворени частици означават, че флаконът не бива да се използва.

Защо не бива да се разклаща

Разклащането е най-честият начин един флакон да бъде похабен. Пептидите са вериги, нагънати в определена форма, а активността им зависи от тази форма. Енергичното разклащане създава срязващи сили и граница въздух–течност, където веригите се разгъват и се слепват една за друга. Видимият резултат е пяна; невидимият е агрегиран пептид, който вече не се държи според характеристиките си. Завъртайте, не разклащайте.

Изчисляване на концентрацията

Концентрацията е просто количеството пептид, разделено на обема добавена вода. Флакон от 5 mg, разтворен с 2 mL бактериостатична вода, дава 2,5 mg/mL. Същият флакон с 1 mL дава 5 mg/mL. Количеството пептид не се променя — променя се само степента на разреждане.

След разтваряне

Разтвореният флакон се съхранява в хладилник, а не във фризер — циклите замразяване и размразяване увреждат пептидите в разтвор. Пазете го от светлина и го връщайте своевременно на хладно, вместо да го оставяте навън между експериментите.

Само за лабораторна и изследователска употреба. Тази статия описва процедура за работа с изследователски материали и не представлява медицинско указание от какъвто и да е вид.